Hoe werkt het klonen van Gibson?
Hoe werkt het klonen van Gibson?

Video: Hoe werkt het klonen van Gibson?

Video: Hoe werkt het klonen van Gibson?
Video: Hoe werkt het brein van Laurent en andere slimmeriken? | UITGEZOCHT #12 2024, November
Anonim

De Gibson Klonen Master Mix bestaat uit drie verschillende enzymen in een enkele buffer. Elk enzym heeft een specifieke en unieke functie voor de reactie: T5 Exonuclease - creëert enkelstrengs DNA 3'-overhangen door terug te kauwen vanaf het DNA 5'-uiteinde. Complementaire DNA-fragmenten kunnen vervolgens aan elkaar versmelten.

Als je dit in overweging neemt, hoe werkt Gibson dan?

De Gibson De Assembly®-methode is een kloneringsprocedure die het klonen van twee of meer fragmenten mogelijk maakt zonder dat restrictie-enzymdigestie of compatibele restrictieplaatsen nodig zijn. In plaats daarvan worden door de gebruiker gedefinieerde overlappende uiteinden in de fragmenten opgenomen om de naadloze verbinding van aangrenzende fragmenten mogelijk te maken.

Evenzo, wat zit er in Gibson Assembly Master Mix? De Gibson Cloning Master Mix bestaat uit drie verschillende enzymen binnen een enkele buffer. Elk enzym heeft een specifieke en unieke functie voor de reactie: T5 Exonuclease - creëert enkelstrengs DNA 3'-overhangen door terug te kauwen vanaf het DNA 5'-uiteinde. Complementaire DNA-fragmenten kunnen vervolgens aan elkaar versmelten.

Hoe werkt de montage van Golden Gate op deze manier?

gouden Poort klonen of Golden Gate montage is een moleculaire kloneringsmethode waarmee een onderzoeker gelijktijdig en gericht meerdere DNA-fragmenten tot een enkel stuk kan assembleren met behulp van Type IIs-restrictie-enzymen en T4-DNA-ligase. Dit montage is in vitro uitgevoerd.

Hoe werkt Gateway-klonen?

De GATEWAY klonen De technologie is gebaseerd op het plaatsspecifieke recombinatiesysteem dat door faag I wordt gebruikt om zijn DNA in de E te integreren. De attL- en attR-plaatsen rond het ingevoegde faag-DNA recombineren plaatsspecifiek tijdens de excisie om de attP-plaats in faag l en de attB-site in de E.

Aanbevolen: