Hoe worden restrictie-enzymen gebruikt bij het uitvoeren van gelelektroforese?
Hoe worden restrictie-enzymen gebruikt bij het uitvoeren van gelelektroforese?

Video: Hoe worden restrictie-enzymen gebruikt bij het uitvoeren van gelelektroforese?

Video: Hoe worden restrictie-enzymen gebruikt bij het uitvoeren van gelelektroforese?
Video: PCR (polymerase kettingreactie) en gelelektroforese (HAVO en VWO) 2024, November
Anonim

1 Antwoord. Om DNA, RNA of plasmide te knippen beperking sites (zoals EcoRI, BamHI, hindIII en BglII) om kleinere genetische fragmenten te creëren die kunnen worden gescheiden en dus gekarakteriseerd met gelelektroforese.

Op dezelfde manier kan men zich afvragen, wat is de rol van restrictie-enzymen?

EEN restrictie-enzym is een eiwit dat een specifieke, korte nucleotidesequentie herkent en het DNA alleen op die specifieke plaats knipt, die bekend staat als beperking plaats of doelsequentie. Bij levende bacteriën functie van restrictie-enzymen om de cel te verdedigen tegen binnendringende virale bacteriofagen.

En hoe weet je welk restrictie-enzym je moet gebruiken? Wanneer u restrictie-enzymen selecteert, wilt u enzymen kiezen die:

  1. Flank uw inzetstuk, maar knip niet in uw inzetstuk.
  2. Bevinden zich op de gewenste locatie in uw ontvangende plasmide (meestal in de Multiple Cloning Site (MCS)), maar knip niet ergens anders op het plasmide.

Hoe worden daarnaast restrictie-enzymen gebruikt in onderzoek?

In het laboratorium, restrictie-enzymen (of restrictie endonucleasen ) zijn gebruikt DNA in kleinere fragmenten knippen. De sneden worden altijd gemaakt op specifieke nucleotidesequenties. Verschillend restrictie-enzymen verschillende DNA-sequenties herkennen en knippen.

Wat is de rol van gelelektroforese?

Gelelektroforese is een techniek die wordt gebruikt om DNA-fragmenten te scheiden op basis van hun grootte. DNA-monsters worden geladen in putjes (inkepingen) aan het ene uiteinde van a gel , en een elektrische stroom wordt toegepast om ze door de te trekken gel . DNA-fragmenten zijn negatief geladen, dus ze bewegen naar de positieve elektrode.

Aanbevolen: