Waarom zou een restrictie-enzym niet knippen?
Waarom zou een restrictie-enzym niet knippen?

Video: Waarom zou een restrictie-enzym niet knippen?

Video: Waarom zou een restrictie-enzym niet knippen?
Video: Restriction Enzymes (Restriction Endonucleases) 2024, November
Anonim

Er kunnen verschillende redenen zijn waarom uw restrictie-enzym snijdt niet het DNA zoals besproken in deze video. De voorbereiding van te splitsen DNA zou moeten vrij zijn van verontreinigingen zoals fenol, chloroform, alcohol, EDTA, detergenten of overmatige zouten, die allemaal kunnen interfereren met restrictie-enzym werkzaamheid.

Waarom knippen restrictie-enzymen in dit opzicht geen bacterieel DNA?

bacteriën hebben restrictie-enzymen , ook wel genoemd restrictie endonucleasen , die snee dubbelstrengs DNA op bepaalde punten in fragmenten. interessant, restrictie-enzymen klieven hun eigen niet DNA . bacteriën hun eigen voorkomen DNA van omhakken door restrictie-enzym door methylering van de beperking plaatsen.

Men kan zich ook afvragen, waar snijden restrictie-enzymen? Beperking Enzym Typen in het algemeen, Type I enzymen knippen DNA op locaties ver van de herkenningssequentie; Type II snee DNA binnen of dichtbij de herkenningssequentie; Type III snee DNA-nabij-herkenningssequenties; en Type IV splitsen gemethyleerd DNA.

Evenzo wordt gevraagd, wat gebeurt er als je te veel restrictie-enzym toevoegt?

Er kan een onvolledige spijsvertering optreden wanneer te veel of te klein enzym is gebruikt. De aanwezigheid van verontreinigingen in de DNA-monster kan verbieden de enzymen , wat ook resulteert in een onvolledige spijsvertering. Sommige restrictie-enzymen vereisen cofactoren voor volledige activiteit.

Waarom werkt mijn restrictieoverzicht niet?

Onvolledig of niet spijsvertering vanwege enzymactiviteit geblokkeerd door DNA-methylatie. Als uw enzym actief is en verteert de controle DNA en de reactie is opgezet onder optimale omstandigheden, maar je ziet nog steeds problemen met spijsvertering , het kan zijn omdat de enzym wordt geremd door methylering van de sjabloon-DNA.

Aanbevolen: